PRÁCTICA 32: TEST DE DROGAS.

• OBJETIVOS:

Determinación cualitativa de varias drogas y sus metabolitos en orina humana.

• FUNDAMENTOS:

Son inmunoensayos competitivos.

• MATERIALES:

- Test Drug-Screen.
- Muestra de orina.

• PROCEDIMIENTO:

- Extraer el test del envoltorio.
- Sumergir la tira en la orina durante aproximadamente 15-30''. La zona de plástico no debe entrar en contacto con la orina.
- Esperar aproximadamente 5' antes de leer los resultados. No interpretar los resultados pasados 10'.

• RESULTADOS E INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS:

La zona de test (T) detectan las drogas que pueden encontrarse en la muestra de orina. La otra es la zona de control (C).
- Resultado - -> aparece una línea rosa en la zona de T y en la zona C.
- Resultado + -> aparece una línea rosa en la zona C.
Si en la zona de control no puede distinguirse claramente la línea rosa, el test es inválido.

• RESULTADOS:

AMP (Anfetaminas) -> -
BDZ (Oxazepam) -> +
CDC (Benzoylecgonina) -> +
MOR/OPIO (Methanfetamina) -> +
THC (Cannabis) -> +

• FOTOGRAFÍAS:

PRACTICA 31: CREATINA QUINASA.

• OBJETIVOS:

Determinación cuantitativa de creatina quinasa (CK).

• UTILIDAD CLÍNICA:

Determinación de niveles elevados en suero en pacientes con alteraciones del músculo esquelético y en infartos de miocardio.

• FUNDAMENTOS:

La CK cataliza la transferencia reversible de un grupo fosfato de la fosfocreatina al ADP. Ésta reacción se acopla con otras catalizadas por la HK y por la glucosa-6-fosfato deshidrogenasa.

• MATERIALES:

- Gradillas.
- Micropipeta 1000 Y 100μL.
- Puntas de pipeta.
- Cubeta de espectofotómetro.

• REACTIVOS:

- R1
- R2

• PROCEDIMEINTO:

Piepetar en una cubeta:
1000 μL de RT Y 20 μL de muestra.
Mezclar e incubar 2' calculamos las distintas absorbancias(4 MEDIDAS) trascurrido 3'.

• RESULTADOS:

  DATOS ESPECTOFOTÓMETRO DATA-TEST ATOM:

- 0,365 nm
- 0,349 nm.
- 0,337 nm.
- 0,348 nm.

VELOCIDAD REACCIÓN ENZIMÁTICA = 105,2 UI/L
CÁLCULO = 105,2 X 8095 = 851, 594 UI/L.

• FOTOGRAFÍAS:
  
  
  
  
  
  
  
  
  
  
  
  
  
  
  
  

 

PRÁCTICA 30: FOSFATASA ÁCIDA.

• OBJETIVOS:

Determinación cuantitativa de fosfatasa ácida (FAC).

• UTILIDAD CLÍNICA:

Determinación de niveles elevados de fosfatasa ácidas se encuentran en alteraciones hematológicas, óseas, hepáticas, alteraciones prostáticas como hipertrófia, prostatitis o carcinoma.

• FUNDAMENTOS:

Método Hillman: La fosfatasa ácida a pH 5.0 hidroliza el  α-naftilfosfato o fosfato inorgánico a α-naftol. El α-naftol se hace reaccionar con un cromógeno diazotado formando un compuesto coloreado con pico de absorción a 405 nm.

• MATERIALES:

- Gradillas.
- Micropipeta 1000 Y 100μL.
- Puntas de pipeta.
- Cubeta de espectofotómetro.

• REACTIVOS:

- RT
- R3
- R4 -> ácido acético.

• PROCEDIMIENTO:

 Añadimos 1000 μL de RT en dos tubos
- FAC Total (T) -> 1000 μL RT, 100 μL de muestra y 5 μL de acético.
- FAC No Prostática (No P) -> 1000 μL RT, 10 μL R3, 100 μL muestra y 5 μL acético
  Mezclamos e incubamos 5' calculamos las distintas absorbancias(4 MEDIDAS) trascurrido 3'.

• RESULTADOS:

- DATOS ESPECTOFOTÓMETRO DATA-TEST ATOM:

FAC TOTAL:
-  0,280 nm.
-  0,296 nm.
-  0,319 nm.
- 0,338 nm.
[] = 14,55
FAC NO PROSTÁTICA:
- 0,205 nm.
- 0,208 nm.
- 0,230 nm.
- 0,215 nm.
[] = 1,750






VELOCIDAD REACCIÓN ->  14,55- 1,750 = 12,8 U/L de FAC prostática.

• FOTOGRAFÍAS: