PRÁCTICA 15: TRIGLICÉRIDOS.

UTILIDAD CLLÍNICA:

Los triglicéridos son grasas que suministran energía a la célula.Al igual que el colestero, son transportados a las células del organismo por las lipoproteínas en la sangre. Una dieta alta en grasas saturadas o carbohidratos puede elevar los niveles de triglicéridos. Su aumento es  relativamente inespecífico. Diversas dolencias, como ciertas disfunciones hepáticas  o diabetes mellitus, pueden estar asociadas con su elevación.


FUNDAMENTOS:

Los triglicéridos incubas con lipoproteinasa liberan glicerol y ácidos grasos libres. El glicerol es fosforilado por glicerolfosfato deshidrogenasa y ATP en presencia de glicerol quinasa para producir glicerol-3-fosfato y adenosina-5-difosfato. El G3P es entonces convertido a dihidroxiacetona fosfato y peróxido de hidrógeno por GPO. Al final, el peróxido de hidrógeno reacciona con 4-aminofenazona y p-clorofenol, reacción catalizada por la peroxidasa dando una coloración roja.

APARATAJE:

- Espectofotómetro.

• MATERIALES:

-Tubos de ensayo.
- Gradilla.
- Micropipeta (1000µl y 10µl).
- Puntas de pipeta.
- Papel parafina.
- Gradilla de espectofotómetro.
- Cubetas de espectofotómetro.

• REACTIVOS:

R1. TRIGLICERIDOS CAL.
MUESTRA(SUERO).

• PROCEDIMIENTO:

-En primer lugar pipeteamos en los diferentes tubos de ensayo las cantidades siguientes:
    1. BLANCO -> 1000 µl R1.
    2. PATRÓN -> 1000 µl R1 y 10µl  TRIGLICERIDOS CAL.
    3. MUESTRA ->  1000 µl R1 y 10µl  TRIGLICERIDOS CAL.
 Seguidamente tapamos con parafina, mezclamos e incubamos 5" a 37ºC. - A continuación leemos la absorvancia del patrón y la muestra, frente a blanco de RT.Color estable como mínimo 30".

• RESULTADOS:

  Absorbancias: - Patrón=0'303 nm. -Muestra= 0,149 nm. Cálculo: Abs. muestra/ Abs. patrón x 200(Conc. patrón)= mg /dL de colesterol en la muestra.
 0,149/0´303 X 200= 98'35 mg/dL de colesterol en la muestra. 

• FOTOGRAFÍAS: