PRÁCTICA 27: GOT (AST)

• OBETIVOS:

Determinación cuantitativa de asparrtato aminotransferasa GOT (AST).

• UTILIDAD CLÍNICA:

Se emplea para diagnóstico de enfermedad hepática, junto con otras enzimas como la ALT y la ALP. También se utiliza en el control post-infarto, en pacientes con desordenes del músculo esquelético, y en otras afecciones.

• FUNDAMENTOS:

La AST, cataliza la tranferencia reversible de un grupo amino del aspartato al  α-cetoglutarato con formación de glutamato y oxalacetato. El oxalacetato producido es reducido a malato en presencia de malato deshidrogenasa y NADH.

• APARATAJE:

- Espectofotómetro.

• MATERIALES:

- Gradillas.
- Micropipeta 1000 Y 100μL.
- Puntas de pipeta.
- Cubeta de espectofotómetro.

• REACTIVOS:

- RT.
- Muestra.

• PROCEDIMIENTO:

Añadimos 1000 μL de RT
Ajustamos el espectofotómetro con todos los datos que nos pide y prodecemos a medir:
- Ajustamos a cero frente a aire.
- Añadimos 100μL de suero al RT, mezclamos bien y traspasamos a una cubeta de espectofotómetro a la que le calculamos las distintas absorbancias(4 MEDIDAS) trascurrido 1'.

• RESULTADOS:

- DATOS ESPECTOFOTÓMETRO DATA-TEST ATOM:

-  1,671 nm.
-  1,674 nm.
-  1,669 nm.
- 1'657 nm.
VELOCIDAD REACCIÓN -> 11,66 U/L de AST

• OBSERVACIONES:

El espectofotómetro utilizado está dando fallo, porque las absorbancias deben ser decrecientes y la primera y la segunda no lo son.

• FOTOGRAFÍAS: