PRÁCTICA 2: GLUCOSA.

• OBJETIVOS: 

Determinación cuantitativa de glucosa.

• UTILIDAD CLÍNICA:

   La glucosa es la mayor fuente de energía para las células del organismo; la insulina facilita la entrada de glucosa en las células.La diabetes mellitus es una enfermedad que cursa con una hiperglucémia(déficit de insulina).

• FUNDAMENTOS:

La GOD (glucosa oxidasa) cataliza laoxidación de glucosa a ácido gluconico. El H2O2, producido se detecta mediante un aceptor cromogénico de oxígeno, fenol-ampirona en presencia de POD (peroxidasa).
La intensidad de color formado es proporcional a la [ ] de glucosa presente en la muestra ensayada.

• APARATAJE:

Espectofotómetro.
Utilidad:
Instrumento utilizado para las medidas de absorción de REM(radiación electromagnética).

• MATERIALES:

- Gradilla.
- Tubos de ensayo(3).
- Micropipetas(10µl y 1000µl).
- Puntas de pipeta.
- Gradilla de espectofotómetro.
- Cubetas de espectofotómetro. 
- Parafina.

• REACTIVOS:

- RT.
- Patrón.
- Muestra(suero). 

• PROCEDIMIENTO: 

- En primer lugar pipeteamos en los diferentes tubos de ensayo las cantidades siguientes:

1.  BLANCO ->  1000 µl de RT
2. PATRÓN -> 1000 µl de RT y 10 µl patrón
3.  MUESTRA -> 1000 µl de RT y 10 µl de muestra(suero).

- Seguidamente tapamos con parafina, mezclamos e incubamos 10" a 37º.
- A continuación leemos la absorvancia del patrón y la muestra, frente a blanco de RT. Color estable como mínimo 30".

• RESULTADOS:

Absorbancias:
- Patrón= 0,337 nm.
-Muestra= 0,316 nm.
Cálculo:
Abs. muestra/ Abs. patrón x 100(Conc. patrón)= mg /dL de glucosa en la muestra.
 0,316/0,337 x 100= 93,77 mg/dL de glucosa en la muestra.

• FOTOGRAFÍAS: